Thursday, August 5, 2010

SIRT3 regulates p53-induced growth arrest/SIRT3 regula el arresto del crecimiento inducido por p53

Li Side et al., (2010) conducted a series of experiments to elucidate the role of mitochondrial p53 in the induction of senescence and identify key proteins that regulate its activity. Cell fractionation, immunohistochemical analysis and confocal imaging of a p53 inducible tet-off sytem in EJ bladder carcinoma cells, showed that p53 localizes in both cellular compartments, nucleus and mitochondria after tetracycline withdrawal. Furthermore, the transfection of p53 truncations and analysis of ensuing levels of prohibitin and senescence –associated (SA) beta-galactosidase activity, allowed to identify p53 domains relevant for premature growth arrest, such as the proline-rich and DNA binding domains. A newly developed antibody for acetylated p53, it was demonstrated that localization of both p53 and Sirt3 in mitochondria is coupled with the deacetylation of mitochondrial p53, prior to irreversible growth arrest. Finally, transduction with Sirt3 was found to temporarily inhibit p53 induced senescence whereas BAG-2 component of CHIP ubiquitin ligase complex was shown to influence the stability of p53 via regulation of CHIP and p53 interaction.


Li Side et al., (2010) realizaron una serie de experimentos con el fin de elucidar la función de p53 mitocondrial en la inducción de senescencia e identificar las proteínas clave que regulan su actividad. Por medio de fraccionamiento celular, análisis immunohistoquímico y microscopía confocal en un sistema tet-off inducible de p53 en células cancerígenas EJ de vejiga, demostraron que una vez retirada la tetraciclina, p53 se localizó en ambos compartimentos celulares, el núcleo y mitocondria. Además, transfecciones múltiples de truncamientos de p53 en combinación con el análisis de los niveles resultantes de prohibitina y beta-galactosidasa asociada a la senescencia (SA), el equipo mapeó los dominios de p53 relevantes para el arresto prematuro del crecimiento, i.e. el dominio rico en prolina y el dominio de unión al DNA. El anticuerpo para especies acetiladas de p53, mostró que la localización de ambos p53 y Sirt3 en mitocondria esta asociada a la deacetilación de p53 mitocondrial, previo a la inducción del arresto celular irreversible. Finalmente, se encontró que la transducción con Sirt3 inhibió temporalmente la senescencia inducida por p53, mientras que el componente BAG-2 del complejo CHIP ubiquitina ligasa favoreció la estabilidad de p53 vía la regulación de la interacción entre p53 y CHIP.

Li, S., Banck, M., Mujtaba, S., Zhou, M.-M., Sugrue, M. M., & Walsh, M. J. (2010). p53-induced growth arrest is regulated by the mitochondrial sirt3 deacetylase. PLoS ONE , 5 (5), e10486+.
URL http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0010486

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